Effect of dietary phosphorus and the ratio between calcium and phosphorus on the activities of alkaline phosphatase and serum calcium and phosphorus in miniature pigs (Xiang pig)


Wang F.L.; Zhang M.F.; Chen Q.M.; Liu P.P.; Xu, M.Q.

Acta Zoonutrimenta Sinica 13(1): 36-42

2001


Effects of dietary phosphorus and the ratio between calcium and phosphorus on the activities of alkaline phosphatase (AKP) in serum, duodenum and the sixth rib and on serum phosphorus and calcium levels were evaluated by using 36 growing castrated Xiang pigs, in a 3 x 3 factorial trial involving 9 diets. For the 9 treatment diets, phosphorus levels of 0.3%, 0.6% and 0.9% were combined with three ratios of 1:1, 1.25:1 and 1.5:1 between calcium and phosphorus. The levels of dietary phosphorus and the ratio between calcium and phosphorus in the diets were adjusted with CaCO3, Na2HPO4 and CaHPO4. The activity of AKP in the serum and in the 6th rib decreased significantly as dietary phosphorus level increased from 0.3% to 0.9% (P<0.05), but the activity of duodenal AKP and serum calcium level were not affected by different levels of dietary phosphorus. There were no effects of the ratio between calcium and phosphorus on AKP activity in serum, duodenum or the 6th rib (P<0.05). Serum phosphorus level increased as dietary phosphorus increased and decreased as dietary calcium to phosphorus ratio increased. Serum calcium level was highest with the 1.25:1 calcium:phosphorus ratio.

13卷
1期
2001年1月
ACTA
ZOONUTRIMENTA
SINICA
Vol.13
,No.
1,36~42
Jan.2001
文章编号:
1006-
267
X(2001)01-
0036-07
日粮磷和钙磷比例对小型猪(香猪)血清
肠、骨碱性磷酸酶及血清钙磷的影响
王凤来,张曼夫,陈清明,刘凡凡,许民强
(中国农业大学动物科技学院,北京10009⑩
摘要:36头生长阶段香猪去势公猪,通过3
x3
析因安排分组,完全随机区组设计,随机分配到9个处理中,
每个处理4个重复,每个重复1头猪。试验两个因子中日粮磷的3个水平分别为0.
3
%.0.
6%和0.
9
%;日粮
钙磷比例的3个水平为1:1、
1.
25:1和1.
5:1。试验基础日粮由玉米、豆粕、血粉和首蓿粉组成,各处理日粮
磷水平和钙磷比例用
CaC03
Na2HP04
CaHP04
调配。从试验开始到结束,每隔两周颈静脉采血一次测血
Afl’
活性和钙、磷,并于试验结束时屠宰全部试验猪取小肠和肋骨样测
AKP
活性。试验结果表明,血清
AKP
活性和第六肋骨
AKP
活性随日粮磷从0.
3%增加至0.
9%显著下降(
P
<
0.
05),
但十二指肠
AKP
性不受日粮磷水平影响。日粮钙磷比例不影响血清、第六肋骨和十二指肠
AKP
活性(
P
>
0.
05)
。血清磷随日
粮磷增加而增加,随日粮钙磷比例增加而下降。血清钙不受日粮磷水平影响,但在日粮钙磷比例为1.
25:1时
最高。
关键词:小型猪(香猪);磷;钙磷比例;碱性磷酸酶;血清钙磷
中图分类号:
S
828.9;S
816.32
文献标识码:
A
THE
EFFECTS
OF
DIETARY
PHOSPHORUS
AND
CALCIUM
TO
PHOSPHORUS
RATIO
ON
THE
ACTIVITIES
OF
ALKALINE
PHOSPHATASE
AND
SERUM
CALCIUM
AND
PHOSPHORUS
IN
MINIATURE
-PIGS(
XIANG
PIG)
WANG
Feng
-
lai,
ZIIANG
Man
-
fu
,
C
IlIEN
(ng
-
ming
,L
IU
Peng
-
peng
,
XU Mm
-
qiang
(College
Animal
Science
and
Technology,
China
Agricultural
Universi
纱,
Beving
100094,
Chin
ABSTRACT:
The
effects
of
dietary
phosphorus
and
calcium
:phosphorus
ratio
on
the
activities
of
alkline
phosphatase(AKP)
in
the
serum
,duodenum
and
the
sixth
rib
and
on
serum
phosphorus
and
calcium
levels
were
evaluated
using
thirty
-
six
growing
castrated
Xiang
pigs
,in
a
3
X3
factorial
trial
involving
nine
di-
ets.
The
basal
diet
of
corn,
soybean,
blood
meal
and
alfalfa
meal
contained
0.
29
%
calcium
and
0.
30
%
phosphorus.
For
the
nine
treatment
diets,
phosphorus
levels
of
0.
3
%,
0.
6
%
and
0.
9
%
were
combined
with
calcium:
phosphorus
ratios
of
1:
1
,
1.25:
1
and
1.5:
l.Levels
of
dietary
phosphorus
and
calcium:
phosphorus
ratio
in
the
diets
were
adjusted
with
CaC03,
Na2HP04
and
CaHP04.
The
activity
of
AKP
in
the
serum
and
in
the
sixth
rib
reduced
significantly
as
dietary
phosphorus
level
increased
from
0.
3
%
to
0.
9
%(P
<0.
05)
,but
the
activity
of
duodenal
AKP
and
serum
calcium
level
were
not
affected
by
different
levels
of
dietary
phosphorus.
There
were
no
effects
of
calcium:
phosphorus
ratio
on
AKP
activity
in
serum
,duodenum
or
the
sixth
rib(P>
0.05)
.
Serum
phosphorus
level
increased
as
dietary
phosphorus
in-
creased
and
decreased
as
dietary
calcium
to
phosphorus
ratio
increased.
Serum
calcium
level
was
highest
with
the
1.25:1
calciu
m
:phosphorus
ratio.
收稿日期:1999-
09-23
作者简介:王凤来(1964),男(汉),籍贯河北遵化,主攻方向单胃动物营养,硕士,副教授。
第1期
王凤来等:
日粮磷和钙磷比例对小型猪(香猪)血清、肠、骨碱性磷酸酶及血清钙磷的影响
37
Ky
wrods
:
miniature
pig(Xiang
pig)
;phosphorus;calcium
to
phosphorus
ratio
;alkaline
phosphatase;
serum
calcium
and
phosphorus
香猪是我国典型的小型猪品种,具有繁殖率高、性成熟早、抗逆性强、肉质好等特点,是制作烤乳猪的首
选品种(刘培琼,1992;陈清明等,1992;解春亭等,1992)。近几年来,研究和开发利用香猪的领域不断拓展,
特别是在人类医学的研究方面。香猪因其体型小、饲养成本低,适应性强、便于管理、易于获取和重复试验等
特性,已被实践证实为极好的试验动物模型。在我国医学界,香猪已经较广泛地应用于动脉粥状硬化、糖尿
病模型、口腔比较医学、外科麻醉技术、西医药理、中医气功和内分泌等方面的研究。
碱性磷酸酶(
Alkaline
Phosphatase,
简称
AKP)
广泛存在于动物机体内,特别是骨骼、肝、肾、小肠、胎
盘、血细胞、乳腺上皮细胞和胆汁中较多。血清
AKP
是一组同工酶,主要来源于骨骼、肝脏、胎盘和小肠等,
其中来源于骨骼的
AKP
占40%'-'75%,来源于小肠的占20%(蒋谷人,1991)。在畜禽钙磷营养研究中,血清
AKP
活性常作为重要的生化检测指标,其敏感程度仅次于骨骼灰分、灰分钙磷或骨骼的机械性能
(
Cromwell
等,1980)
Hurwitz
和(]
riminger(l96l)
在研究日粮钙对鸡的营养作用时指出,血浆
AKP
活性升
高标志着骨骼矿化不足。当鸡发生佝偻症时血清
AKP
活性异常升高(何谓霞等,1987),因而鸡血清
AKP
以作为诊断佝偻症鸡的辅助指标。
Boyd
等(1983)研究猪对磷利用率的结果证实,血浆
AKP
活性是评定饲
料原料磷有效利用率的最有效且最敏感的指标。因此,血清(浆)
AKP
在钙磷饲养试验或平衡试验中可以充
当重要的检测指标,协助评定日粮钙磷水平的适宜程度。
本试验目的是通过饲养试验探讨日粮不同磷水平和钙磷比例对香猪血清、小肠和骨骼
AKP
活性以及
血清钙磷水平的影响,为确立香猪适宜的日粮钙磷水平提供试验依据。
1
材料和方法
1.
1
试验设计
试验为双因子3水平(3
x3)
析因安排分组,完全随机区组设计,每个因子3个水平,共9个处理,每个处
理4个重复,每个重复1头猪。日粮两个因子分别为日粮磷和钙磷比例,磷的3个水平分别为0.
3
%、0.
6%和
0.
9
%,钙磷比例的3个水平分别为
l:l
l.
25
:1
和1.5:1。试验选用二月龄小型香猪去势公猪36头,试验猪
初始平均体重5.37
kg,
随机分配到9个处理中。试验全期11周,试验猪结束平均体重19.
89
kg
1.
2
试验日粮及营养水平
试验基础日粮由玉米、豆粕、首蓿粉、血粉组成,添加分析纯
CaC03
Na2HP04
CaHP04
并通过等量替
换基础日粮中玉米调配各处理日粮的钙磷水平(表1、表2)。
1.3
试验猪饲养管理
试验猪饲养于舍内铁制金属笼中,单笼尺寸为长800
mm×
宽420
mm×
高650
mm,
每笼1头猪,饲槽喂
表1试验基础日粮配方及营养水平
Table
1.
Ingredients
and
nutrients
the
basal
diet
配方
Ingredients
in
diet
(
营养水平
Nutrient
level
(
玉米
Corn
苜蓿粉
Alfalfa
meal
豆粕
Soybean
meal
血粉
Blood
meal
食盐
Salt
添加剂
Additives
74.
70
12.
18
7.00
5.65
0.27
0.20
干物质
DM
消化能
DE
粗蛋白质
CP
Ca
总磷
TP
有效磷
AP
92.
84
2.99
15.00
0.29
0.30
0.
18
赖氨酸
L
ys
蛋+胱氨酸
Met+Cys
粗纤维
Crude
fiber
0.80
0.60
6.
12
1.干物质、钙、磷为实测值,其他营养成分为计算值;有效磷按王和民等(1990)的方法计算,下表同。
2.每千克饲料维生素和微量元素含量:维生素
A
,45001U;
维生素
D3
,15001U;
维生素
E,135
IU;
维生素1(3
,2.
7
mg;
维生
Bi
,0.9mg;
维生素
B2
,2.
7mg;
维生素
B6
,1.4mg;
维生素
B12
,0.
01mg;
烟酸,18
mg;
泛酸,10.
8
mg;
氯化胆碱,200
mg
Fe,
100mg
;Cu
,l0mg
;Mn
,8mg
;Zn
,100mg
;I
,0.
2mg
;Se
,0.
3mg
。金霉素
(15
%)600
mg
38
动物营养学报
第13卷
表2试验各组日粮处理的设计和实测结果
Table
2.
The
design
and
test
results
nine
treatments
磷水平
P
levels
钙磷比例
Ca
:P
ratio
0.
3
%
0.6%
0.9%
1:1
1.25:1
1.5:1
1
:1
1.25:1
1.5:1
1
:1
1.25:1
1.5:1
Ca
(
%)
0.29
0.40
0.47
0.64
0.80
0.94
0.91
1.
16
1.38
总磷
ip
(
0.30
0.32 0.32
0.62
0.63
0.62
0.93
0.93
0.93
有效磷
AP
(
0.
18
0.
18
0.
18
0.50
0.50
0.50
0.81
0.81
0.81
钙磷比例
Ca
:
P
0.98:1
1.
24
:1
1.48:1
1.
02
:
1
1.28:1
1.48:1
0.97:1
1.
24:1
1.48:1
干物质
DM(
92.
52
92.
37
92.
71
93.01
92.
89
92.
81
92.
62
92.
60
93.
00
潮拌料,每日6:00、
ll:00
及16:00时共喂3次。水槽饮水,饮用水为去离子水。试猪试验前去势驱虫。试验
期间逐日结料,试验开始与结束时称重。试验猪舍内平均温度15。
C
1.
4
样品的制备与分析
1.4.1
血清样品制备。试验开始后,每隔两周早8
:00空腹采血15
m1,
收集于塑料离心管中并在试管架中静
置30分钟凝血,将凝血离心管置于离心机(
Centrifuge
HITACHI
SCT4B
助中,4000
r/
mmn
离心15分钟分
离血清,用滴管将血清转移到1.
5
m1
的离心管中,放入~20。
C
冰箱中保存,待测
Afl’
活性和血清钙磷。
1.4.2
小肠样品和骨骼样品的采集。试验结束时屠宰全部试验猪,并迅速采集小肠样和肋骨样品,小肠样品
取样部位在十二指肠远端距幽门17.
5
cm
处,取5
cm
长迅速收集于液氮罐中,然后转移至~80。
C
的冰箱中保
存,待制备小肠匀浆液。同时,在右侧第六肋骨近胸剑状软骨端,剥离骨膜,取下肋骨10
cm
并迅速收集于液
氮罐中,采集后全部样品转移到~80。
G
水箱中存放,待制备骨样悬浊液。
1.4.3
肋骨和小肠试样的制备。取出冷冻的骨样放入冰盒中低温操作,先用骨剪剪碎骨样,然后称取
1.
5000士0.
000
Sg,
放入50
m1
塑料试管中,加入10
m1
0.9
%的生理盐水,用匀浆机以20000
r/
mmn
速度,连续
三次共1分钟(20秒/次)将骨样制成匀浆,取匀浆后的悬浊液1.
5
m1
于2.
0
m1
的离心管中,放入低温超速离
心机(
TL
-
100
Ultracentrifuge
Beckman)
4
C,40000r/
mmn
离心1小时,收集上清液置于1.
5
m1
离心管中,
-
20。
C
冰箱保存,待测骨
Afl’
和蛋白。制备小肠试样时,称取小肠样2.
0000士0.
000
Sg,
其他环节操作与肋
骨试样制备和贮存方式相同。
1.4.4
AKP
活性的测定。采用
A
KP
-C03
缓冲液试剂盒(北京中生生物工程技术公司产品),酶动力学方
法测定
AKP
活性。酶反应为:
对硝基苯磷酸盐+
H20
AKPpHl0.2
对硝基苯酚+磷酸盐
测定前,将制备好的血清、小肠和第六肋骨测试样置于高速微量离心机(
LG-
15W
北京),15000
r/
离心5分钟。取样品25.
0如1,加配置好的
AKP
试剂盒工作液1.
25
m1,
使用自动紫外/可见光分光光度计
(
uv/
vis
ectrophotometer
Lambda
7
Perkin
-Elmer),
测试设置条件为波长405
nm
(Hg),
反应温度30。
C,
测定时每隔30秒钟读数一次,对每个样品读6次共持续3分钟,测得每分钟光密度变化值并计算出
AKP
性(
U/L)
血清、小肠和第六肋骨的蛋白含量测定。测定样品蛋白含量(
ng/
L)
的目的是换算样品的
AKP
比活
性(
UI
mg
Pro.)
。用考马斯亮兰法测定蛋白含量(
Coomassie
Brillant),
取样品5如1,考马斯亮兰试剂
4.
95
m1,
混匀后5分钟,使用岛津120分光光度计,波长595
nm,
测出吸光光度值。依牛血清白蛋白吸光度标
准曲线,查出蛋白含量(
mg
Pro./L),
再计算出血清、小肠和第六肋骨样品的比活性(
U/mg
Pro.)
1.4.6
血清钙磷测定。取样0.
5000
m1,
经过湿法消化(
GB
6436-
92)
前处理后,定容25
m1
过滤,用等离子体
(
ICAP
-9000.
USA)
测定并计算钙磷含量。
1.
5
数据处理
采用
Harvey
程序对试验数据进行方差分析和用
LSD
法进行因素水平间多重比较,方差分析最小二乘
估计线性模型为
Y
+
Pi
+
C
巧+
Pi
XC
巧+
e,
其中
I-t
代表群体平均值;
Pi
代表日粮磷水平效应(
i=l,2,
3)
;CPj
代表日粮钙磷比例效应
G=l,2,3);Pi
XC
巧代表日粮磷和钙磷比例互作效应(
U=
11,12,13
D33);
mmn
L4.5
第1期
王凤来等:
日粮磷和钙磷比例对小型猪(香猪)血清、肠、骨碱性磷酸酶及血清钙磷的影响
39
e
代表随机残差。统计表中的平均数是最小二乘均数,
SE
是最小二乘均数标准误。
2
结果与分析
2.
1
生长性能
香猪在5.
37~
19.
89
kg
生长阶段,日粮不同磷水平和钙磷比例对其平均日增重(
P>
0.
05)
、平均日耗料
(
P
>0.
05)
和料重比(
P>0.05)
等生长性能无显著影响。所有9个不同日粮组合的生长性能统计结果,平均
日增重188.
69士1.
lOg,
平均日耗料679.
97士4.
70
g,
料重比3.64:
1。本实验平均日增重略高于
Chen
Qing
-
ming
等(1992)在小型猪营养需要量研究中的建议值167
g(
表3)。
2.
2
血清、第六肋骨和小肠的碱性磷酸酶活性(
AKP)
血清
AKP
测定结果表明(表4)
,
1:
1、
1.25:
1和1.
5:
1等3个日粮钙磷比例对血清
AKP
活性无影响
(
P
>
0.
05)
。在3个不同日粮磷水平之间,当日粮磷水平从0.
3%增加到0.
9%时,血清
AKP
活性下降,并且
于试验第四、六、八周和试验结束时差异显著(
P
<
0.
05)
。日粮磷水平0.
3%的血清
AKP
活性比另两个磷水
平在第四周时分别高37.
60
%(
P<
0.
05)
和58.
32
%(
P
<0.
01)
。而在上述试验各阶段,日粮磷水平0.
6%和
0.
9%之间比较,血清
AKP
活性前者略高于后者,但差异均不显著(
P>
0.05)
小肠的
AKP
比活性在日粮3个磷水平和钙磷比例间比较差异不显著(
P
>
0.
05)
。第六肋骨
AKP
比活
性受日粮磷水平作用显著(
P
<0.05)
。当日粮磷水平为0.
3%时,第六肋骨
AKP
比活性最高,且显著高于
0.
9
%磷水平日粮3.04
U/lOOmg
Pro.
(P
<0.01)
00.6
%和0.
9
%磷水平日粮间的第六肋骨
AKP
比活性差
异不显著(
P>0.05,
表5)。
2.3
血清钙磷
比较日粮3个磷水平对应的血清磷含量,当日粮磷水平在0.
3%时血清磷最低,0.
9%时最高,但仅在试
验第二周(
P
<0.01)
、第六周(
P<0.05)
和试验结束时(
P<0.01)
差异显著,并且0.
9
%磷水平日粮血清磷显
表3
日粮不同磷水平和钙磷比例对生长性能的影响1
Table
3.
The
effects
dietary
phosphorus
and
calcium
:phosphorus
ratio
on
growth
pe
orm
ance
(k
磷水平
P
levels
钙磷比例
Ca:P
ratio
sE
篦稠警雅2
Pi
xc
0.3%
0.6% 0.9%
显著性检验3
1:1
1.
25
:
1
1.5:1显著性检验3
试验猪数
Pigs
12
12
12
12
12
12
初重
Initial
weight
5.31
5.31
5.25
5.54
NS
5.40
5.36
5.35
NS
0.65
NS
末重
Final
weight
19.59
19.59
19.
80
20.29
NS
19.
82
19.
92
19.
94
NS
1.52
NS
日增重
ADG(g)
187
190
189
NS
190
190
187
Ns
2
Ns
日耗料
ADFI(g)
671
674
695
NS
684
685
670
NS
8
Ns
料重比
Fl
G(:1)
3.63
3.60
3.69
NS
3.67
3.64
3.61
NS
0.04
NS
1.同一行数据肩标不同者差异显著(
P<0.05),
相同者差异不显著(
P>
0.
05)
;
2.
日粮磷水平与钙磷比例之间的互作效
应;3.
NS
表示差异不显著,*表示差异显著(
P<0.05),*
*表示差异极显著(
P<0.01);
以后各表均相同。
表4
日粮不同磷水平和钙磷比例对血清
AKP
活性(
UI
L)
的影响1
Table
4.
The
ef'ects
dietary
phosphorus
and
calium
:phaphorus
ratio
on
serum
A
KP(U/L)
磷水平
P
levels
钙磷比例
Ca:P
ratio
sE
磷与钙磷
比例互作2
Pi
XC
0.3%
0.6% 0.9%
显著性检验3
1:1
1.
25
:
1
1.5:1显著性检验3
试验猪数
Pigs
12
12
12
12
12 12
试验初始0
week
69.
84
75.
14
70.
55
NS
71.56
72.
93
70.
09
N5
6.32
NS
第二周2
th
week
82.
80
78.93
71.
80
NS
69.74
83.
84
79.
95
N5
8.32
NS
第四周4
th
week
121.
56a
88.
34"b
76.
78b
*
93.78
92.
29
100.60
N5
10.21
NS
第六周6
th
week
114.
19a
92.
11"b
71.
if
*
97.67
93.52
86.21
N5
11.27
NS
第八周8
th
week
115.
25a
88.
98"b
75.
32"
*
96.99
87.
34
95.22
N5
11.71
NS
试验结束
The
end
89.
95a
58.
56"
62.75"
x x
71.26
63.76
76.
24
N5
7.06
NS
40
动物营养学报
第13卷
著地高于0.
3
%磷水平日粮(
P
<0.01),
而0.
6%和0.
9
%磷水平之间差异不显著(
P>0.05)
。在3个不同日
粮钙磷比例间比较中,日粮钙磷比例1:1时血清磷最高,1.
5:1时最低,且仅在试验第二周(
P<0.05)
、第四
周(
P<0.05)
和试验结束时(
P<0.01)
差异显著,而1.25:1和1.5:1之间差异不显著(
P
>
0.
05)
。日粮磷和
钙磷比例互作效应对血清磷影响显著(
P<0.05,
见表
O
血清钙不受日粮磷水平影响。在日粮不同钙磷比例比较中,仅在试验第二周和第八周时差异显著(
P>
0.
05),
而且均以1.25:1钙磷比例日粮的血清钙较高,1.25:1与1:1之间和1.25:1与1.
5:1之间的血清钙
差异显著(
P
<0.05)
3
讨论
3.
1
血清
AKP
活性
本试验证实,日粮钙磷比例从1:1增大到1.5:1时不影响血清
AKP
活性;但当日粮磷水平从0.
3%增
加到0.
6%时血清
AKP
活性表现出突然下降的趋势,而从0.
6%增加到0.
9%时
AKP
活性变化很小。这一
结果表明,血清
AKP
更易受日粮磷水平影响,但对日粮钙磷比例反应相对较弱。
Koch
等(1985
,198刃曾报
道,即使日粮钙磷比例从1:1增大到3:1时,血清
AKP
活性仍未发生显著变化。
Coal
son
等(1972)、
En-
g
Strom
等(1985)、
Koch
等(1986)
.
Boyd
等(1983)和苏卫等(199伪的试验结果则证实,日粮低磷或磷缺乏,
血清或血浆
Afl’
活性升高,而且血浆
Afl’
活性与骨骼矿物质沉积呈强的负相关关系。
表5
试验结束时血清、小肠和肋骨
AKP
活性(
U/
100mg
Pro.)'
Table
5.
The
effects
diet
a
phosphorus
and
calium
:phosphorus
ratio
on
the
activities
the
alkaline
phosphatase
in
the
rib,
duodenum
and
serum
at
the
end
the
trial(U/
lOOm
gPro.)
磷水平
P
levels
钙磷比例
Ca
:P
ratio
磷与钙磷
sE
比例互作2
0.3
%
0.6%
0.9%
显著性检验3
1
:1
1.25:1
1.5:1显著性检验3
Pi
XC
试验猪数
Pigs
12
12 12
12
12
12
血清
Serum
0.131"
0.085"
0.091b
x
x
0.103
0.092
0.111
N5
0.010
NS
十二
指肠
Duodenum
2.
95
2.47
2.86
NS
2.83
2.29
2.32
N5
0.366
NS
第六肋骨
Sixth
rib
14.
87a
12.
97"b
11.83"
*
13.65
13.74
12.27
N5
0.772
NS
表6
日粮不同磷水平和钙磷比例对血清钙、磷的影响1
Table
6.
The
effects
dietary
phosphorus
and
calcuim
:phosphorus
ratio
on
serum
phosphorus
and
calium
磷水平
P
levels
钙磷比例
Ca:P
ratio
sE
磷与钙磷
比例互作2
Pi
XC
0.3%
0.6%
0.
9
%
显著性检验3
1:1
1.
25
:
1
1.5:1显著性检验3
血清
Ca
Serum
calcium(mg/
l00ml)
试验猪数
Pigs
12 12
12
12 12 12
试验初始0
week
9.49
9.65
9.80
NS
9.45
9.73
9.54
N5
0.36
NS
第二周2
th
week
8.24
8.04
8.73
NS
7.76"
9.41b
7.
9Y
**
0.76
NS
第四周4
th
week
9.55
9.35
10.03
NS
10.30
9.21
9.42
N5
0.42
NS
第六周6
th
week
10.63
11.
97
11.04
NS
10.65"
12.34b
10.
65a
*
0.56
NS
第八周8
th
week
10.79
11.
02
11
16
NS
10.95"
11.92b
10.
59a
*
0.32
NS
试验结束
The
end
8.63
8.
15
7.76
NS
8.53
7.76
8.25
N5
0.33
NS
血清
P
Serum
phosphorus(mg/
l00ml)
试验猪数
Pigs
12 12 12
12 12 12
试验初始0
week
6.78
6.79
6.62
NS
6.75
6.66
6.77
N5
0.18
NS
第二周2
th
week
6.
12a
7.
00"b
7.
79"
x x
7.67"
6.74"b
6.51b
*
0.35
*
第四周4
th
week
7.47
7.25
7.35
Ns
7.97"
7.34"b
6.75"
*
0.32
*
第六周6
th
week
8.
02a
8.
71"
"
9.93b
*
9.72
8.51
8.43
NS
0.46
x x
第八周8
th
week
7.53
8.
14
8.01
Ns
7.82
7.78
7.57
NS
0.28
*
试验结束
The
end
6.24"
6.52b
7.49"
x x
7.31"
6.63"b
6.29b
x
x
0.22
x x
第1期
王凤来等:
日粮磷和钙磷比例对小型猪(香猪)血清、肠、骨碱性磷酸酶及血清钙磷的影响
41
血清
Afl’
活性是几种同功酶活性的综合值,这些同功酶主要来自于骨骼、肝脏和小肠。本试验对健康
香猪空腹采血样,血清
AKP
同功酶中,来自于肝脏和小肠的
AKP
活性相对稳定,因而血清
AKP
活性间接
反映来源于骨骼成骨细胞的
Afl’
活性状况。当日粮磷水平为0.
3%时产生较高血清
AKP
活性的原因,可能
是日粮低磷导致猪骨组织成骨细胞增生且功能增强,使成骨细胞的
AKP
大量释放进入血液,从而提高血清
AKP
活性。这一现象符合骨代谢规律(黄大有,1985;殷国荣,1993)。因此,不适宜的骨骼矿化是造成低磷日
粮所引起高血清
AKP
的重要原因。当日粮磷为0.
6%和0.
9%时,血清
AKP
活性趋于下降而变化平稳,说
明日粮0.
6%和0.
9%的磷水平可获得适宜的骨骼矿化。
3.
2
小肠
AKP
活性
Radec
ki
等(1992)报道,不同铜水平对十二指肠等肠道
AKP
活性作用不显著。
Moore
等(1984,
1983)和
Pointillart
等(1987)在研究大鼠和猪的日粮植酸磷利用率时指出,尽管不同来源植酸磷的消化吸收
差异很大,但十二指肠的
AKP
活性却表现相同,其研究结果证实十二指肠
AKP
活性对植酸磷的消化和吸
收不起作用。何谓霞等(1987)研究实验性佝偻症对鸡血清、肠、肝、肾、骨中
AKP
活性影响的试验结果证实,
高磷低钙导致的实验性佝偻症鸡肠、肝、肾的
AKP
活性与对照组无差异。本试验统计结果也相应证实十二
指肠
AKP
活性不受日粮磷水平和钙磷比例影响,说明在本试验条件下不同的日粮钙磷在十二指肠的消化
吸收与十二指肠
AKP
活性无关。
但在人类医学的血清
AKP
检验中通常采用空腹状态采血的方式以避免小肠
AKP
同功酶干扰(蒋谷
人,1991),这说明小肠的生理状态确实影响血清
AKP
活性。所以,本研究结果中日粮磷和钙磷比例不影响
十二指肠
AKP
活性的另一原因可能在于取样的时间。本试验所有十二指肠样品采集于禁食16小时后屠宰
的试验猪,此时小肠食糜已经排空,钙磷的吸收活动可能处于暂时停滞状态,从而导致小肠
AKP
活性相对
稳定,这一状态下
AKP
的检测结果并未及时反映日粮进食后钙磷在小肠消化吸收时的
AKP
活性状况。因
此,今后研究日粮钙磷对小肠
AKP
影响时,应注重探讨钙磷进食后的取样时间对小肠
AKP
活性的作用效果。
3.3
骨骼
AKP
活性
本试验第六肋骨
AKP
活性的检测结果证实,0.
3%日粮磷水平比0.
6%或0.
9%表现出较高的骨骼
AKP
活性,说明生长阶段香猪在11周的试验期间较低日粮磷摄入量导致骨形成过程中用于骨盐即羟基磷
灰石(3
Ca3(P04)2⑩
Ca(OH)2)
沉积的磷源贫乏,引起骨盐沉积不足,从而刺激并加剧成骨细胞增生,使得骨
组织成骨细胞和骨细胞始终保持积极的骨无机基质形成状态,羟基磷灰石核晶(
Ca2(P03)2)
的合成(
C2++
Ca
+
R~0~P03
AKPpHg
Ca3(P03)2+R)
代谢活跃。
Hoshin
。等(1998)在研究磷酸盐摄入量与大鼠骨骼矿物质
代谢时也同样证实,低日粮磷摄入量将导致骨骼
Afl’
活性升高,并最终伴随佝偻病症状发生。因此,本研究
证实0.
3%日粮低磷水平可导致香猪骨盐沉积不足,骨矿化较差;而日粮0.
6%和0.
9
%磷处理组较低的
AKP
活性反映骨骼发育相对较好。
3.
4
血清钙磷
本试验血清磷检测结果表明,血清磷随日粮水平增加而升高,并随日粮钙磷比例增加而下降,且当日粮
钙磷比例为1:1时血清磷含量最高。
Cromwell
等(1970)、
Coalson
等(1972)
,
Koch
等(1984
,1985
,1986)的研
究报道也同样证实这一试验结果。血清钙在本试验条件下不受日粮磷水平影响,当日粮钙磷比例增加时,仅
在试验第二周和第八周时差异显著(
P<0.05),
而且均以1.
25:
1钙磷比例日粮的血清钙含量最高。上述结
果说明日粮钙磷比例为1.25:1时有利于钙的消化吸收。在统计结果中,日粮磷和钙磷比例的互作效应对血
清磷作用显著,但在9个组合日粮之间并未表现规律性变化。
4
小结
在本试验条件下,当日粮磷水平从0.
3%增加到0.
9%时,香猪血清和骨骼
AKP
活性显著下降,血清磷
升高。随日粮钙磷比例由1:1增至1.5:1时,血清磷含量下降,血清钙含量在钙磷比例1.25:1时最高,血清
和骨骼
AKP
活性无显著差异。十二指肠
AKP
活性不受日粮磷和钙磷比例影响。
42
动物营养学报
第13卷
参考文献
陈清明,裴德智,王连纯.1992.中国实验用小型猪种质特性的研究[
A].
科学养猪之路[
C].
北京:北京科技出版社,
P491~
495.
何谓霞,张晓雷,刘芄芄,贾
锋,齐顺章.1987.实验性佝偻症对鸡血清、肠、肝、肾、骨碱性磷酸酶的影响[
J].
畜牧兽医学报,
18(2)
:99~
103.
黄大有主编1985.实验诊断的理论基础和临床意义[
M].
第二版
北京:人民卫生出版社
蒋谷人主编1991.临床生化检验诊断手册[
M].
郑州:河南科技出版社
刘培琼.1992.
Proceeding
of
the
international
symposium
on
chinese
pig
breed[
S].
ISN7
-
81008
-
275
-
2/
Q
,P525~
529.
卫,冯泽光.1990.仔猪钙磷缺乏症的病理学研究[
J].
畜牧兽医学报,21(3)
:268~274.
解春亭,李素芬,陈清明.1992.小型香猪生长发育规律的研究[
A].
科学养猪之路[
C].
北京:北京科技出版社,
P506~
513.
殷国荣,姚树展,杨建一,李巨海.1993.缺磷症和肝功障碍奶牛血清碱性磷酸酶的诊断价值[
J].
畜牧兽医学报,24
(⑩:359~
365.
Body
R
D
,Hall
D
,Wu
J
F.
1983.
Plasma
alkaline
phosphatase
as
a
criterion
for
determining
biological
availability
of
phos
-
phorus
for
swine[J].JAnim.Sci.,57:396~401.
Chen
Qing
-
ming
Huang
Thong
,Wang
Lian
-
chun.
1992.
Proceeding
of
the
international
symposium
on
Chinese
pig
breed
[S].ISN7-
81008-
275-
2/Q.26,P521~524.
Coalson
J
A
,Maxwell
C
V
,Hillier
J
C
,Washam
R
D
,Nelson
E
C.
1972.
Calcium
and
phosphorus
requirements
of
young
pigs
reared
under
controlled
environmental
conditions[J].JAnim.Sci.,35:1194~
1200.
Cromwell
G
L.
1980.
Biological
availability
of
phosphorus
for
pigs[J].
Feedst
uffs,52(9)
:
38.
Cromwell
G
L
,
V W
Hays,
C
H
Chaney
,J
R
Overfield.
1970.
Effects
of
dietary
phosphorus
and
calcium
level
on
perfor
-
mance
,bone
mineralization
and
carcass
characteristics
of
swine
[J
]
.
J
Animal
Sci.
,30
:519~
525.
Engstrom
G
W
,Horst
R
L
,Reinhardt
I
A
,Littledike
E
1.
1985.
Effect
of
dietary
phosphorus
levels
on
porcine
renal
25
-
hydroxyvitamin
D
-
1
alpha
-
and
24R
-
hydroxylase
activities
and
plasma
1
,25
-
dihydroxyvitamin
D3
concentration
[J].JAnim.Sci.,60:1005~
1011.
Hoshino
H
,Kushida
K,Takahashi
M
,Koyama
S
,Yamauchi
H
,Inoue
1.
1998.
Effects
of
low
phosphate
intake
on
bone
and
mineral
metabolism
in
rats:
evaluation
by
biochemical
markers
and
pyridinium
cross
-
link
formation
in
bone[J].
A
nn.
Nutr.Metab.,42(2)
:110~118.
Hurwitz
S
,
P
Griminger.
1961.
The
response
of
plasma
alkaline
phosphatase
,parathyroids
and
blood
and
bone
minerals
to
calcium
intake
in
the
fowl[J].J
Nutr.,73
:177.
Koch
M
E
,Mahan
D
C
,Corley
J
R.
1984.
An
evaluation
of
various
biological
characteristics
in
assessing
low
phosphorus
in
-
take
in
weanling
swine[J].JAnim.Sci.,59:1546~
1556.
Koch
M
E,
Mahan
D
C.
1985.Biological
characteristics
for
assessing
low
phosphorus
intake
in
growing
swine
[J]
.J
A
nim.
Sci.
,62
:163~
172.
Moore
RJ
,Reeves
P
G,Veum
T
L.
1984.
Influence
of
dietary
phosphorus
and
sulphaguanidine
levels
on
P
utilization
in
rats
[J].
Br.J
Nutr.,51
:453~465.
Moore
R
J
,Veum
T
L.
1983.
Adaptive
increase
in
phytate
digestibility
by
phosphorus
-
deprived
rats
and
the
relationship
of
intestinal
phytase
(
EC
3.
1.
3.
8)and
alkaline
phosphatase(EC3.
1.
3.
1)to
phytate
utilization[J].
Br.
J
Nutr.
,49
:145~
152.
Pointillart
A
,A
Fourdin
,N
Fontaine.
1987.
Importance
of
cereal
phytase
activity
for
phytate
phosphorus
utilization
by
gro
-
wing
pigs
fed
diets
containing
tritical
or
corn[J
].
J
Nutr.
,117
:907~
913.
Radecki
S
V
,Ku
P
K,Bennink
M
R
,Yokoyama
M
T
,Miller
E
R.
1992.
Effect
of
dietary
copper
on
intestinal
mucosa
enzyme
activity
,morphology
,and
turnover
rates
in
weanling
pigs[J
].
J
A
nim.
Sci.
,70
:1424~
1431